一、实验准备
在进行生物医学研究时，wako质谱级赖氨酰肽链内切酶125-05061的实验准备是至关重要的，确保使用优质的试剂和设备能有效提高实验的成功率。

二、单位定义
赖氨酰肽链内切酶的活性单位定义为在30℃和pH 9.5条件下，每分钟产生1μmol对硝基苯胺所需的酶量。计算公式为：AU/vial=[(a-b)/25] × (1/962) × (40/01)，其中a为检测样品中的吸光度，b为空白对照中的吸光度。

三、实验操作流程
为了避免蛋白质的捕获，需使用聚硅酮涂层的微量离心管和吸头。接下来，可使用质谱分析专用的凝胶染色试剂盒，如银染剂MS试剂盒（产品编号：299-58901）和负凝胶染色MS试剂盒（产品编号：293-57701）进行以下步骤：
1. 电泳分离蛋白质样品。
2. 从凝胶中切割蛋白质片段并放入微量离心管中。
3. 使用质谱分析用凝胶染色试剂盒中的脱色溶液进行凝胶脱色。
4. 向试管中加入300μL乙腈，进行30分钟的振荡。
5. 去除乙腈，并用Parafilm膜封住微量离心管。
6. 在Parafilm膜上打孔，进行15分钟的真空干燥。
7. 将100μL 10mmol/L DTT溶解于100mmol/L碳酸氢铵中，在56℃恒温1小时。
8. 室温下冷却后，使用等量的50mM碘乙酰胺和100mmol/L碳酸氢铵在暗处恒温45分钟并进行涡旋混合。
9. 用100μL 100mmol/L碳酸氢铵清洗凝胶片段，洗涤10分钟。
10. 用300μL乙腈干燥凝胶片段15分钟。
11. 用100μL 100mmol/L碳酸氢铵膨胀凝胶片段15分钟。
12. 再次用300μL乙腈干燥凝胶片段15分钟。
13. 去除液相，进行15分钟的真空干燥。
14. 加入100μL赖氨酸内切酶溶液，在冰水浴中膨胀凝胶片段45分钟。
15. 去除100μL赖氨酸内切酶溶液，将凝胶片段放入37℃、含10μL 50mmol/L Tris-HCl (pH 8.5)的环境中过夜。
16. 添加50μL 20mmol/L碳酸氢铵，20分钟内振荡凝胶片段以抽提多肽。
17. 用5%甲酸/50%乙腈进行3次抽提多肽，持续20分钟。
18. 如有需要，可用SpeedVac浓缩提取的多肽。
19. 使用ZipTip进行多肽的脱盐和纯化。
20. 如果需要，可将多肽在弱真空环境下浓缩至2μL。
21. 最后，加入基质进行质谱分析。

四、购买渠道
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