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NEWSBsaI,GMP级内切酶 - 918博天娱乐官网生物医疗产品精选
来源:晏威丽 日期:2025-03-28活性定义1: 活性单位(U)指在50μl反应体系中,37℃下1小时内完全酶切1µg pPIC9K(Dcm-)所需的酶量。蛋白纯度通过SDS-PAGE凝胶电泳检测,确保蛋白纯度不低于95%。
星号活性: 在37℃下,使用50μl CutBuffer F, GMP Grade反应体系,将20 U的BsaI, GMP Grade与1μg pPIC9K(Dcm-)共同孵育1小时,检测结果未发现其他核酸酶的污染或星号活性导致的底物非特异性降解。需要注意的是,更长时间的酶切可能会引发星号活性。
非特异性内切酶活性: 在37℃下,采用50μl CutBuffer F, GMP Grade反应体系,将20 U BsaI, GMP Grade与1μg超螺旋质粒DNA共同孵育4小时后,再通过琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示少于20%的质粒DNA转变为缺刻或线性状态。
DNase活性: 在37℃下,使用20μl CutBuffer F, GMP Grade反应体系,将20 U BsaI, GMP Grade与15 ng双链DNA片段共同孵育16小时,琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,双链DNA片段没有变化。
RNase活性: 在37℃下,采用10μl CutBuffer F, GMP Grade反应体系,将20 U BsaI, GMP Grade与500 ng RNA共同孵育1小时后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示不低于90%的RNA仍然保持完整。
同裂酶:Eco31I、Bso31I、BspTNI识别位点为:GGTCTC(1/5)5' GGTCTC(N)₁↓ 3' 3' CCAGAG(N)₅↑ 5'。BsaI, GMP Grade由大肠杆菌重组表达获得,能够在15分钟至1小时内精确完成目标DNA的酶切。这款产品遵循918博天娱乐官网的GMP标准,确保了生产过程及原辅料的全程可追溯。
整个生产过程中未使用任何抗生素或动物来源的原料及辅料,并严格控制宿主蛋白、外源DNA、非特异性内切酶、DNase、RNase等工艺相关杂质,以及微生物限度、细菌内毒素等。该产品满足疫苗和药物生产等领域对原辅料的高标准要求。
失活条件为80℃温育20分钟。在甲基化敏感性方面,对于被CpG甲基化的DNA,剪切可能受到阻碍;同样,对于被Dcm甲基化的DNA,剪切也可能受到阻碍。
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