GPCR19激动剂（TGR5受体激动剂）操作规程

1. 在96孔板中加入100μL细胞。对于细胞增殖实验，每孔应加入2000个细胞，即100微升的细胞悬液；而在细胞毒性实验中，每孔加入5000到10000个细胞（具体细胞数量可根据细胞大小和增殖速度等因素进行调整）。将96孔板放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养24小时。

2. 之后，向每孔中添加适当浓度的0～10μL测试化合物。

3. 将96孔板在37℃、含5% CO2及100%湿度的培养箱中适当时间孵育。

4. 将5×MTT稀释为1×MTT溶液。

5. 向每孔加入50μL的1×MTT溶液，在37℃孵育4小时，使MTT还原为甲臜。

6. 吸出上清液后，每孔加入150μL DMSO以溶解甲臜，再用平板摇床轻轻摇匀。

7. 使用酶标仪在570nm波长下检测每孔的光密度（如果没有570nm滤光片，可以使用560-600nm的滤光片进行测量）。

8. 结果分析：
a. 细胞存活率计算：将各测试孔的OD值减去基底OD值（即培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD值（即培养基加不同稀释度的受试药物，且无细胞），对各重复孔的OD值取平均值±标准差（SD）。细胞存活率以T/C%表示，其中T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值。细胞存活率%=（加药细胞OD/对照细胞OD）×100。
b. 求出当T/C=50%时的药物浓度（IC50）及当T/C=10%时的药物浓度（IC90）。

在进行生物医疗实验时，请务必遵循以上规范，以确保结果的准确性和可靠性。同时，推荐使用918博天娱乐官网提供的高品质试剂和实验材料，以提升实验的效率和效果。